En este curso aprenderás los conceptos básicos de cromatografía, conocerás los componentes de un cromatógrafo de líquidos y comprenderemos los fundamentos de la separación cromatográfica para aplicarlos al desarrollo de un método cromatográfico.
Dirigido a:
Estudiantes y egresados de carreras de las áreas de Ciencias de la Salud o Químico-Biológicas, tales como Química, QFB, QBP, Biología, Bioquímica, Biotecnología y afines, así como estudiantes de posgrado o profesionistas, con poco o nulo conocimiento
del tema que busquen adquirir conocimientos básicos sobre cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC).
Ponente:
TEMARIO EXTENDIDO Y ACTUALIZADO:
1. Presentación del curso.
2. Introducción.
- Importancia de las separaciones.
- Técnicas de separación.
- Aplicaciones de las separaciones analíticas.
- Aplicaciones de la cromatografía por industria.
3. Conceptos básicos de cromatografía.
- Definición de cromatografía.
- Clasificación en la cromatografía.
4. Cromatografía de líquidos en columna.
- Conceptos básicos de cromatografía en columna.
- Procedimiento de separación en columna.
- Información representada en un cromatograma.
- Problemas por mal empaquetamiento de columna.
5. Conceptos básicos de HPLC.
- Definición de HPLC.
- Diferencias en el manejo de LC en columna y HPLC.
- Columnas cromatográficas.
- Fase móvil.
- Polaridad de las fases móvil y estacionaria.
- Conceptos básicos en HPLC.
6. Tipos de elución.
- Acondicionamiento de columna.
- Elución isocrática.
- Elución por gradiente.
7. Principales tipos de cromatografía en HPLC.
- Tipos de cromatografía por mecanismo de interacción.
- Adsorción.
- Partición.
- Intercambio iónico.
- Exclusión por tamaño.
- Afinidad.
- Otros mecanismos.
8. Componentes de un cromatógrafo de líquidos.
- El cromatógrafo HPLC.
- Rack de disolventes y reservorios.
- Bomba.
- Automuestreador.
- Compartimiento de columna.
- Detector.
9. Cromatogramas y su integración.
- Integración.
- Parámetros de integración.
10. Buenas prácticas de laboratorio en HPLC.
- Filtración y desgasificación.
- Uso de disolventes.
- Fugas.
- Cálculo de gasto de disolvente.
- Preparación de muestra.
- Lavado y almacenamiento de columna.
- Remplazos y consumibles.
11. Confiabilidad en HPLC.
- Definiciones.
- Adecuabilidad del sistema.
- Fuentes de variación.
- Repetibilidad del sistema.
- Uso de QCs.
12. Desarrollo de un método cromatográfico.
- Bases para el planteamiento de un método cromatográfico.
- Longitudes de onda de trabajo.
- Determinación de pureza de pico.
- Reporte de un método cromatográfico.
- Descripción del método de adquisición.
- Resultados y su procesamiento.
- Reporte de análisis.
- Reporte de compuesto.
13. Pruebas comunes en HPLC.
- Identificación y caracterización de un compuesto.
- Análisis cuantitativo.
- Patrón o estándar externo.
- Patrón o estándar interno.
- Determinación de pureza.
- Sensibilidad del detector.
- Carryover.
- Factor de simetría.
14. Ejemplos de aplicaciones en HPLC.
15. Problemas comunes en HPLC.
- Problemas comunes y su posible origen.
- Uso adecuado de columnas.
- Fugas.
- Caducidad de disolventes y fase móvil.
- Crecimiento de microorganismos.
- Picos fantasmas.
- Lavado de columna.
- Preparación de muestra.
- Secado del sistema.
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